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第四层就是我们现在所看到的《蒙娜丽莎》，这是1513年在之前的基础上更改而来的画像。

八、蒙娜丽莎十大恐怖之处：没有眉毛

　　蒙娜丽莎为什么没有眉毛?有人说达·芬奇为了画中人的脸能达到“黄金分割”的比例，故意没画眉毛。有人说，剃掉眉毛是当时妇女的美容习惯，所以画中人没有眉毛。法国的工程师兼发明家帕斯卡·科特宣称他解开了这个谜底。科特用自制的高清晰相机拍照观察了这幅世界名画，将《蒙娜丽莎》的脸部放大24倍发现在蒙娜丽莎消失的左眉位置上有一笔勾画眉毛的油墨痕迹。为什么画的如此隐晦?目前还不得而知。

　　九、蒙娜丽莎十大恐怖之处：眼睛会动

　　蒙娜丽莎的眼睛应该是略偏向右侧的但是仔细看一段时间就会发现她的眼睛慢慢转向前面，注视着你。哈佛大学神经科专家利文斯通博士认为这或许与人体视觉系统有关。人类的眼睛内有两个不同部分接收影像，中央部分负责分辨颜色、细致印记，环绕浅窝的外围部分则留意黑白、动作和阴影。由于观看者改变了眼睛位置，所以会有这种感觉。

　　十、蒙娜丽莎十大恐怖之处：后面有魔鬼

　　1911年8月22日，那天是星期一，法国卢浮宫的闭馆日。卢浮宫的油漆匠温琴佐·佩鲁贾把《蒙娜丽莎》从画框中取下来，藏在衣服中偷走了。连夜赶到意大利佛罗伦萨，第一次做贼难免心虚，整天东躲西藏，吃不好睡不安。夜里睡不着， 拿出画来独自欣赏，谁知他看着看着，就见画中蒙娜丽莎的背后有魔鬼，大叫起来。隔壁的男人听闻赶来，打开门，发现佩鲁贾已经倒在地上不省人事，人小心地卷起那幅画，迅速消失。

　　他将画拿回家藏了起来，就在他打开画欣赏时，他也看见了画中的魔鬼。随后就再也没有打开过，在生命的最后时刻，他写下遗嘱，说那幅画是魔鬼的肖像，叫家人不要打开看，也不要声张，悄悄将画送回去。《蒙娜丽莎》才得以重现人间。

蒙娜丽莎十大恐怖之处最引人关注的莫过于外星人的说法，有网友将这副画通过镜像处理，发现背景后面有一个疑似骷髅头的形状。有传是一个外星人，也有指达芬奇可能身份为外星人。有关于画作背景中的骷髅头到现在为止，还似乎是一个未解开的谜底。